氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量測定 測定意義 GSH/GSSG是細(xì)胞內(nèi)最重要的氧化復(fù)原對之一。因而,測定細(xì)胞內(nèi)GSH和GSSG含量以及GSH/GSSG比值,可以很好地反映細(xì)胞所處的氧化復(fù)原狀態(tài),也是谷胱甘肽氧化復(fù)原循環(huán)的主要指標(biāo)之一。 測定原理:應(yīng)用2-VP法測GSSG含量。 需求的儀器:耗材:低溫離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)理移液器、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、和蒸餾水。 GSSG含量計算 依據(jù)規(guī)范曲線,將樣品△A帶入公式中(x),計算出樣品濃度y(μg/mL)。 (1)按蛋白濃度計算 GSSG(μg/mgprot)=yXV樣十(V樣XCpr)=y+Cpr (2)按樣實(shí)質(zhì)量計算 GSSG(ug/g鮮重)=yXV樣+(V樣+V樣總XW)=y六W (3)按細(xì)胞數(shù)量計算 GSSG(μg/10'cell)=yXV樣+(V樣+V樣總X細(xì)胞數(shù)量)=y六細(xì)胞數(shù)量 (4)按液體體積計算 GSSG(μg/mL)=2y V樣總:上清液總體積,1mL;. V樣:參加反響體系中上清液體積,100μL=0.1mL; W:樣質(zhì)量量,g; Cpr:.上清液蛋白質(zhì)濃度,mg/mL; 細(xì)胞數(shù)量,以10°為單位計量; 血漿(血細(xì)胞)稀釋一倍。
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