植物類黃酮含量檢測試劑盒 Plant Flavonoids Content Assay Kit
產(chǎn)品描述 植物類黃酮是廣泛存在于蔬菜、水果、牧草和藥用植物中的次生代謝物,主要以游離態(tài)或與糖結(jié) 合為苷的形式存在,屬于生物活性強(qiáng)、毒副作用小、藥用價值高的天然植物成分,在醫(yī)藥領(lǐng)域具有廣 闊的應(yīng)用前景和潛在的開發(fā)利用價值。 類黃酮與鋁離子能夠在堿性亞硝酸鹽溶液中形成紅色絡(luò)合物,產(chǎn)物在 510 nm 處具有特征吸收峰, 通過吸光值的變化即可定量檢測植物類黃酮的含量。 產(chǎn)品使用說明 測定過程中所需要的儀器和試劑:可見分光光度計(jì)、1 mL 玻璃比色皿、研缽/勻漿器、可調(diào)式移 液器、臺式離心機(jī)、恒溫水浴/培養(yǎng)箱和蒸餾水。 1.植物類黃酮的提?。筛鶕?jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果適當(dāng)調(diào)整樣本量及比例) 取適量植物樣本烘干至恒重,粉碎后過 30-50 目篩;稱取 0.1 g 粉碎樣本,加入 1 mL 提取液,超 聲提?。?0℃,功率 300 W,超聲 5 s,間歇 8 s,總時間 30 min);12000 rpm 常溫離心 10 min,取全 部上清即為待測樣本。 2.測定步驟 ①分光光度計(jì)預(yù)熱 30 min 以上,調(diào)節(jié)波長至 510 nm,蒸餾水調(diào)零。 ②在離心管中依次加入下列試劑:
吸光值測定(顯色后 1 h 內(nèi)完成測定):將反應(yīng)液置于 1 mL 玻璃比色皿中,測定 510 nm 處吸光 值,記為 A 測定、A 對照、A 標(biāo)準(zhǔn)和 A 空白;計(jì)算?A 測定=A 測定-A 對照,?A 標(biāo)準(zhǔn)=A 標(biāo)準(zhǔn)-A 空 白。注:每個測定管均需設(shè)一個對照管,空白管只需測定 1-2 次。
標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立:以 0.4、0.2、0.1、0.05、0.025 mg/mL 為橫坐標(biāo)(x),以其對應(yīng)的?A 標(biāo)準(zhǔn)為縱 坐標(biāo)(y),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到標(biāo)準(zhǔn)方程 y=kx+b,將?A 測定帶入公式中得到 x(mg/mL)。 1. 植物類黃酮含量的計(jì)算 注意事項(xiàng) ①若?A 測定超出標(biāo)準(zhǔn)線性吸光值范圍:建議適當(dāng)增加樣本量或?qū)⒋郎y樣本適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測 定,計(jì)算時相應(yīng)修改; ②為保證結(jié)果準(zhǔn)確且避免試劑損失,測定前請仔細(xì)閱讀說明書(以實(shí)際收到說明書內(nèi)容為準(zhǔn)), 確認(rèn)試劑儲存和準(zhǔn)備是否充分,操作步驟是否清楚,且務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本進(jìn)行預(yù)測定, 過程中問題請您及時與工作人員聯(lián)系。
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