尿素氮含量檢測(cè)試劑盒 Urea Nitrogen Content Assay Kit 
一、尿素氮含量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品描述 尿素氮（BUN）是人體蛋白質(zhì)代謝的主要終末產(chǎn)物，構(gòu)成了血液中絕大部分的非蛋白質(zhì)氮。血清
尿素氮含量與腎小球功能密切相關(guān)，在一定程度上能夠反映出腎小球的濾過(guò)功能，可作為衡量腎功能
的主要指標(biāo)之一。
脲酶水解尿素產(chǎn)生的 NH3-N，在強(qiáng)堿性介質(zhì)中能夠與次氯酸鹽和苯酚生成水溶性藍(lán)色染料靛酚
藍(lán)，產(chǎn)物在 630 nm 處具有特征吸收峰，通過(guò)吸光值變化即可定量檢測(cè)尿素氮的含量。 二、產(chǎn)品內(nèi)容附圖 
三、尿素氮含量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品使用說(shuō)明 測(cè)定過(guò)程中所需要的儀器和試劑：可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96 孔板、研缽/勻漿
器、可調(diào)式移液器、臺(tái)式離心機(jī)、恒溫水浴/培養(yǎng)箱和蒸餾水。 樣品處理（可根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果適當(dāng)調(diào)整樣本量及比例）
①組織：按照組織質(zhì)量（g）：蒸餾水體積（mL）為 1：（5-10）的比例（建議稱取 0.1 g 組織，加
入 1 mL 蒸餾水）處理樣品，冰浴勻漿，4℃ 12000 g 離心 15 min，取上清置于冰上待測(cè)。
②細(xì)菌或細(xì)胞：離心收集細(xì)菌或細(xì)胞至離心管內(nèi)，按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104 個(gè)）：蒸餾水體積（mL）
為（500-1000）：1 的比例（建議 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1 mL 蒸餾水）處理樣品，冰浴超聲破碎（功
率 300 W，超聲 3 s，間隔 7 s，總時(shí)間 3 min），4℃ 12000 g 離心 15 min，取上清置于冰上待測(cè)。
③血清（漿）、培養(yǎng)液等液體樣本：直接檢測(cè)或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行檢測(cè)。 2.測(cè)定步驟
①分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱 30 min，波長(zhǎng)調(diào)至 630 nm，蒸餾水調(diào)零。
②在離心管中依次加入下列試劑 
吸光值測(cè)定：吸取 200 μL 反應(yīng)液于 96 孔板或微量玻璃比色皿中，測(cè)定 630 nm 處吸光值，記為
A 測(cè)定、A 對(duì)照、A 標(biāo)準(zhǔn)和 A 空白；計(jì)算?A 測(cè)定=A 測(cè)定-A 對(duì)照，?A 標(biāo)準(zhǔn)=A 標(biāo)準(zhǔn)-A 空白。注：空
白管只需測(cè)定 1-2 次，每個(gè)測(cè)定管均需設(shè)一個(gè)對(duì)照管。 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立：以 40、30、20、10、5、2.5 μg/mL 標(biāo)準(zhǔn)稀釋液濃度為橫坐標(biāo)（x），以其對(duì)應(yīng)的
?A 標(biāo)準(zhǔn)為縱坐標(biāo)（y），繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到標(biāo)準(zhǔn)方程 y=kx+b，將?A 測(cè)定帶入公式中得到 x（μg/mL）。 3.尿素氮含量計(jì)算 
四、尿素氮含量檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng) ①若A測(cè)定超出標(biāo)準(zhǔn)吸光值線性范圍：超出最高值建議將待測(cè)樣本適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定；低于
最低值可適當(dāng)增加樣本量重新制備待測(cè)樣本后再進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算時(shí)相應(yīng)修改； ②顯色完成后應(yīng)在1 h內(nèi)完成測(cè)定，測(cè)定管顏色應(yīng)與標(biāo)準(zhǔn)管顏色一致（藍(lán)色），若顯色為黃色或綠
色，則表明NH3-N濃度過(guò)高，應(yīng)將待測(cè)樣本適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算時(shí)相應(yīng)修改； ③為保證結(jié)果準(zhǔn)確且避免試劑損失，測(cè)定前請(qǐng)仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū)（以實(shí)際收到說(shuō)明書(shū)內(nèi)容為準(zhǔn)），
確認(rèn)試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備是否充分，操作步驟是否清楚，且務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本進(jìn)行預(yù)測(cè)定，
過(guò)程中問(wèn)題請(qǐng)您及時(shí)與工作人員聯(lián)系。
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