脂肪酸類 - 甘油三酯(TG)含量檢測試劑盒說明書 Triglyceride (TG) Content Assay kit 一、甘油三酯(TG)含量檢測試劑盒產(chǎn)品描述 甘油三酯(TG)是由長鏈脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,不僅是細胞膜的主要成分,也是重要的
呼吸底物和供能物質(zhì),在脂肪酸運輸過程中具有重要作用。血清中內(nèi)源性三酰甘油主要以 VLDL 的
形式運輸,外源性三酰甘油主要以 CM 的形式運輸,甘油三酯含量的增高與動脈粥樣硬化性心血管疾
病密切相關(guān)。
甘油三酯經(jīng) KOH 皂化水解生成甘油及脂肪酸,過碘酸氧化甘油生成甲醛,在銨離子存在下甲醛
能夠與乙酰丙酮縮合生成黃色物質(zhì),產(chǎn)物在 420 nm 處具有特征吸收峰,通過吸光值的變化即可定量
檢測甘油三酯的含量。
二、甘油三酯(TG)含量檢測試劑盒產(chǎn)品內(nèi)容
三、甘油三酯(TG)含量檢測試劑盒產(chǎn)品使用說明 測定過程中所需要的儀器和試劑:可見分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96 孔板、研缽/勻漿
器、可調(diào)式移液器、臺式離心機、恒溫水浴、正庚烷、異丙醇和蒸餾水。 甘油三酯(TG)的提?。筛鶕?jù)預(yù)實驗結(jié)果適當調(diào)整樣本量及比例) ①細菌或細胞:離心收集細菌或細胞至離心管內(nèi),按照細菌或細胞數(shù)量(104 個):試劑一體積(mL)
為(500-1000):1 的比例(建議 500 萬細菌或細胞加入 1 mL 試劑一)處理樣品,冰浴超聲破碎(功
率 20%或 200 W,超聲 2 s,間隔 1 s,總時間 1 min),4℃ 8000 g 離心 10 min,取上清待測。 ②組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為 1:(5-10)的比例(建議稱取 0.1 g 組織,加
入 1 mL 試劑一)處理樣品,冰浴勻漿,4℃ 8000 g 離心 10 min,取上清待測。 ③血清(漿)、培養(yǎng)液等液體樣本:直接測定或適當稀釋后再進行測定。 測定步驟
①分光光度計/酶標儀預(yù)熱 30 min 以上,調(diào)節(jié)波長至 420 nm,蒸餾水調(diào)零。 ②在離心管中依次加入下列試劑: 注:加入試劑二后需劇烈震蕩,振蕩幅度、時間、反復(fù)次數(shù)以及等待分層時間均應(yīng)保持一致; 吸光值測定:取 200 μL 反應(yīng)液至微量玻璃比色皿或 96 孔板中,測定 420 nm 處吸光值,記為 A
測定,A 標準和 A 空白;計算?A 測定=A 測定-A 空白,?A 標準=A 標準-A 空白。注:空白管只需測
定 1-2 次。 3.甘油三酯(TG)含量計算
四、甘油三酯(TG)含量檢測試劑盒注意事項 ①為確保試驗重復(fù)性,加入試劑二后需劇烈震蕩,振蕩幅度、時間、反復(fù)次數(shù)以及等待分層時間
均應(yīng)保持一致,檢測體系中 65℃水浴后冷卻時間應(yīng)保持一致; ②若測定吸光值超出標準吸光值線性范圍:高于最高值將樣品使用試劑一適當稀釋后再進行測定,
低于最低值建議適當增加樣本量后再進行測定,計算時相應(yīng)修改; ③檢測過程中使用具有易揮發(fā)性物質(zhì),建議在通風(fēng)櫥中進行測定,并做好防護措施; ④為保證結(jié)果準確且避免試劑損失,測定前請仔細閱讀說明書(以實際收到說明書內(nèi)容為準),
確認試劑儲存和準備是否充分,操作步驟是否清楚,且務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本進行預(yù)測定,
過程中問題請您及時與工作人員聯(lián)系。
產(chǎn)品鏈接:http://www.sdkaiwen.com/products-199.html 文章來源:http://www.sdkaiwen.com/newss-139.html |