植物總酚含量檢測(cè)試劑盒
一、植物總酚含量檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)描述 酚類(lèi)物質(zhì)是植物體中重要的次生物質(zhì),對(duì)植物生長(zhǎng)發(fā)育有一定的調(diào)節(jié)作用,能夠清除自由基起到
抗氧化的作用,并具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和醫(yī)療保健作用,同時(shí)在植物抗病、基因的誘導(dǎo)表達(dá)和生物固
氮等方面也具有重要作用,在化妝品、食品和醫(yī)藥等領(lǐng)域具有廣泛應(yīng)用。
酚類(lèi)物質(zhì)在堿性條件下能夠?qū)㈡u鉬酸還原生成藍(lán)色化合物,產(chǎn)物在 760 nm 處具有特征吸收峰,
通過(guò)吸光值的變化即可定量檢測(cè)植物中總酚的含量。
二、植物總酚含量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品內(nèi)容
三、植物檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品使用說(shuō)明 植物總酚的提?。筛鶕?jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果適當(dāng)調(diào)整樣本量及比例)
植物樣本烘干至恒重,粉碎后過(guò) 30-50 目篩;稱(chēng)取約 100 mg 粉碎樣本,加入 2 mL 提取液,超聲
提?。?0℃,功率 300 W,超聲 5 s,間歇 8 s,總時(shí)間 30 min),12000 rpm 常溫離心 10 min,取上清
即為待測(cè)樣本。 .測(cè)定步驟
①分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱 30 min 以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 760 nm,蒸餾水調(diào)零。
②在 96 孔板或微量玻璃比色皿中依次加入下列試劑:
吸光值測(cè)定:測(cè)定 760 nm 處吸光值,記為 A 測(cè)定、A 對(duì)照、A 標(biāo)準(zhǔn)和 A 空白;計(jì)算?A 測(cè)定=A
測(cè)定-A 對(duì)照,?A 標(biāo)準(zhǔn)=A 標(biāo)準(zhǔn)-A 空白。注:每個(gè)測(cè)定組均需設(shè)一個(gè)對(duì)照組,空白組只需測(cè)定 1-2 次。
標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立:以 0.3、0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125 mg/mL 為橫坐標(biāo)(x),以其對(duì)應(yīng)的?A
標(biāo)準(zhǔn)為縱坐標(biāo)(y),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到標(biāo)準(zhǔn)方程 y=kx+b,將?A 測(cè)定帶入公式中得到 x(mg/mL)。 3.植物總酚含量計(jì)算
四、植物總酚含量檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng) ①若測(cè)定吸光值超出標(biāo)準(zhǔn)吸光值線性范圍,建議適當(dāng)增加樣本量或?qū)⒋郎y(cè)樣本適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行
測(cè)定,計(jì)算時(shí)相應(yīng)修改; ②為保證結(jié)果準(zhǔn)確且避免試劑損失,測(cè)定前請(qǐng)仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū)(以實(shí)際收到說(shuō)明書(shū)內(nèi)容為準(zhǔn)),
確認(rèn)試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備是否充分,操作步驟是否清楚,且務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本進(jìn)行預(yù)測(cè)定。
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