土壤有效硼;測(cè)定方法;注意事項(xiàng)
硼是植物正常生長(zhǎng)發(fā)育不可缺少的微量元素,能夠促進(jìn)植物生長(zhǎng)茂盛和生殖器官的正常發(fā)育,有利于開(kāi)花結(jié)實(shí),促進(jìn)作物早熟,提高產(chǎn)量和品質(zhì)。土壤缺硼,易使作物根尖分生組織的細(xì)胞分化和伸長(zhǎng)受到抑制,發(fā)生木栓化而壞死,并形成“蕾而不花”、“花而不實(shí)”、“有殼無(wú)仁”及“不穗癥”等,嚴(yán)重影響農(nóng)作物的產(chǎn)量和品質(zhì);但供硼過(guò)多會(huì)使作物形成硼中毒,因此根據(jù)土壤有效硼含量,合理供給硼元素是提高作物產(chǎn)量和品質(zhì)的關(guān)鍵措施之一。土壤有效硼的檢測(cè)準(zhǔn)確度是制定施硼數(shù)量的重要依據(jù),現(xiàn)就土壤有效硼檢測(cè)方法介紹如下。
1主要儀器
實(shí)驗(yàn)所用的儀器主要有分光光度計(jì)、石英三角瓶(250mL)、10mL的比色管、2cm光徑比色皿、石英回流冷卻裝置等。
2試劑配制
2.1高錳酸鉀溶液的配制稱(chēng)取高錳酸鉀31.606g溶于水中,稀釋至1L。
2.23mol/L 硫酸溶液的配制量取濃硫酸168mL,緩慢加入到盛有約800mL水的大燒杯中,不斷攪拌,冷卻后,稀釋至1L。
2.3酸性高錳酸鉀溶液的配制將2.1、2.2中配制的高錳酸鉀溶液與硫酸溶液等體積混合。
2.410%(m/v)抗壞血酸溶液的配制稱(chēng)取抗壞血酸10g溶于水中,稀釋至100mL。
2.510%的硫酸鎂溶液的配制稱(chēng)取10.0g硫酸鎂溶于水中,稀釋至100mL。
2.60.90%甲亞胺溶液的配制稱(chēng)取甲亞胺0.90g和抗壞血酸2g溶于微熱的60mL水中,稀釋至100mL。
2.7pH值5.6～5.8緩沖液的配制稱(chēng)取250g乙酸銨和10.0g EDTA二鈉鹽溶于水中,冷卻后稀釋至500mL,再加入80mL 1:4硫酸溶液,搖勻用酸度計(jì)檢查pH。
2.8混合顯色劑的配制3份(體積)甲亞胺溶液和2份pH值5.6～5.8緩沖液混合。
2.9硼標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的配制稱(chēng)取預(yù)先干燥24h的硼酸(優(yōu)級(jí)純)0.5719g于400mL燒杯中,加無(wú)硼水溶液,移入1L容量瓶中定容,貯于塑料瓶中。吸取50.00mL上述溶液于500mL容量瓶中,定容,即為10μg/mL硼標(biāo)準(zhǔn)系列溶液,貯于塑料瓶中。分別吸取0.0mL、0.50mL、1mL、2mL、3mL、4mL、5mL于7個(gè)50mL容量瓶中,定容,即為0.0 mg/mL、0.10mg/mL、0.20mg/mL、0.40mg/mL、0.60mg/mL、0.80mg/mL、1mg/mL硼標(biāo)準(zhǔn)系列溶液,貯于塑料瓶中。
3操作步驟
①稱(chēng)取通過(guò)2mm孔徑尼龍篩的風(fēng)干土樣10g于250mL石英三角瓶中,加入20mL水,裝好回流冷凝器,文火煮沸并保持微沸5min(準(zhǔn)確計(jì)時(shí)),移開(kāi)熱源,繼續(xù)回流冷凝5min(準(zhǔn)確計(jì)時(shí)),取下三角瓶,冷卻。同時(shí)做空白試驗(yàn)。②在煮沸過(guò)的樣品溶液中加入2滴硫酸鎂溶液加速澄清,1次性傾入濾紙上,濾液承接于塑料瓶中。③吸取4mL濾液于10ml比色管中,加入0.50mL酸性高錳酸鉀溶液,搖勻,放置2～3min;加入0.50mL抗壞血酸溶液,搖勻;待紫紅色消退且二氧化錳沉淀完全溶解后,加5mL混合顯色劑,搖勻;放置1h后,在分光光度計(jì)上于波長(zhǎng)415nm處,用2cm光徑比色皿比色測(cè)定,讀取吸光度,以扣除空白后的吸光值查校準(zhǔn)曲線得到測(cè)定液的含硼量。用同樣方法做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
4結(jié)果計(jì)算
有效硼(mg/kg)=(m1×D/m×103)×1000
式中:m1為顯色液中硼的的含量(μg),D為分取倍數(shù)(20/4),m為試樣質(zhì)量。103 和1000為換算系數(shù)。
5注意事項(xiàng)
①硼標(biāo)準(zhǔn)系列溶液、高錳酸鉀溶液和硫酸溶液應(yīng)貯于塑料瓶中。高錳酸鉀溶液和抗壞血酸要現(xiàn)用現(xiàn)配。②因甲亞胺試劑本身顏色較深,影響吸光度,加入5mL混合顯色劑用胖肚吸管,提高準(zhǔn)確率,減少誤差。③由于溶液吸光度在分光光度計(jì)內(nèi)不太穩(wěn)定,每批樣品要在1h內(nèi)完成。④每10個(gè)土樣做1個(gè)平行測(cè)定,平行測(cè)定結(jié)果以算術(shù)平均值表示,保留2位小數(shù),允許絕對(duì)誤差。⑤甲亞胺-H比色法適合較高濃度的測(cè)定。不同土壤含量的檢測(cè)靈敏度不同,甲亞胺藥品質(zhì)量對(duì)測(cè)量結(jié)果影響較大。一般優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品顏色黃亮,無(wú)雜質(zhì),若有暗黃色雜質(zhì)、黑色沉淀物較多為劣質(zhì)藥品,測(cè)量結(jié)果不理想,所以一定選用優(yōu)質(zhì)甲亞胺藥品。吸取的濾液放在塑料比色管中。塑料比色管一定要清洗干凈,以最大可能減少誤差。在閉光、恒溫的條件下,放在25℃保溫箱中1～2h,再用分光光度計(jì)測(cè)定。 上海原鑫品牌優(yōu)勢(shì) 1、產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)：產(chǎn)品具有高特異性、回收率高、線性好、變異系數(shù)低、穩(wěn)定性好； 2、質(zhì)量保證：產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，每批次產(chǎn)品必須通過(guò)QA、QC檢測(cè)才可出庫(kù)； 3、實(shí)力強(qiáng)大：ISO9001:2015認(rèn)證，標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室、研發(fā)中心，動(dòng)物房，高新技術(shù)企業(yè)； 4、技術(shù)支持：技術(shù)部5*8小時(shí)技術(shù)問(wèn)題及時(shí)解答； 5、服務(wù)周到：發(fā)貨及時(shí)，三個(gè)工作日順豐快遞；售后無(wú)憂，包退包換。 研發(fā)、生產(chǎn)科研產(chǎn)品： ELISA試劑盒：多種屬、1000多種指標(biāo)：人、大小鼠、通用、牛、兔、山羊、倉(cāng)鼠、豬、馬、雞、犬、豚鼠、猴、綿羊 抗體：兔多抗、鼠單抗種類(lèi)豐富，一抗1萬(wàn)余種，二抗100多種； 重組蛋白：多項(xiàng)發(fā)明專(zhuān)利，原核表達(dá)系統(tǒng)穩(wěn)定表達(dá)蛋白1000余種。 ------------------------------------------------------------------------------------------------------------------ 在線聯(lián)系：17621047120（周經(jīng)理） QQ：2441609688 （任經(jīng)理） 官方電話：400-788-2680 更多生化生理代測(cè)檢測(cè)服務(wù)：http://www.sdkaiwen.com/daice-34-1-1.html |
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