苯丙氨酸解氨酶(PAL)代測檢測服務(wù)
1.測定原理 苯丙氨酸解氨酶(phenylalanineammonialyase,PAL)催化苯丙氨酸的脫氨反應(yīng),使NH3釋放出來形成反式肉桂酸。此酶的在植物體內(nèi)次生物質(zhì)(如木質(zhì)素等)代謝中起重要作用。根據(jù)其產(chǎn)物,反式肉桂酸在290nm處吸光度的變化可以測定該酶的活性。 2.儀器設(shè)備 (1)紫外分光光度計(2)高速冷凍離心機(jī) (3)研缽(4)移液管:0.5mL1支,1mL3支,2mL1支,5mL1支 (5)試管:10mL5支(6)恒溫水浴 3.試劑 (1)0.1mol·L-1硼酸緩沖液,pH8.8。 (2)0.02mol·L-1L-苯丙氨酸(用pH8.8硼酸緩沖液配制)。 (3)提取介質(zhì):內(nèi)含0.05mol·L-1硼酸緩沖液、5.0mmol·L-1巰基乙醇、1.0mmol·L-1EDTA-Na2、5%甘油pH8.3;5%PVP(聚乙烯吡咯烷酮)。 (4)6mol·L-1HCl。 4.材料 正常生長或經(jīng)誘導(dǎo)處理的水稻、小麥葉片(或黃化幼苗)、馬鈴薯塊莖等植物新鮮組織。 5.方法步驟 (1)PAL的提?。喝〈郎y植物樣品1-2g,-15冷凍固定后于研缽中加少量的提取介質(zhì)、少量石英砂,冰浴研磨勻漿,最后用提取介質(zhì)定容到10mL,攪拌均勻,4層紗布過濾,濾液在4下10000r/min離心15min,上清液即為待測酶液,4保存?zhèn)溆谩?/span> (2)PAL酶活性測定:取4支10mL試管(3支測定管,1支對照管),分別加入0.02mol·L-1L-苯丙氨酸1.0mL(對照管不加,代之為蒸餾水),硼酸緩沖液(pH8.8)2.0mL,酶液1.0mL(根據(jù)酶活性適當(dāng)稀釋或增加體積),總體積4.0mL。搖勻后置30恒溫水浴保溫60min,加0.2mL6mol·L-1HCl終止反應(yīng),若有沉淀需過濾或離心。用對照管調(diào)零,在290nm處檢測測定管反應(yīng)液的吸光度A290. (3)以測定管反應(yīng)液每小時A290增加0.01為一個酶活性單位(U): 式中,Vt:酶液總體積(mL);FW:樣品鮮重(g);Vs:測定時取酶液的量(mL);v:反應(yīng)液總體積(mL);t:反應(yīng)時間(h)
上海原鑫品牌優(yōu)勢
1、產(chǎn)品優(yōu)勢:產(chǎn)品具有高特異性、回收率高、線性好、變異系數(shù)低、穩(wěn)定性好; 2、質(zhì)量保證:產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定,每批次產(chǎn)品必須通過QA、QC檢測才可出庫; 3、實(shí)力強(qiáng)大:ISO9001:2015認(rèn)證,標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室、研發(fā)中心,動物房,高新技術(shù)企業(yè); 4、技術(shù)支持:技術(shù)部5*8小時技術(shù)問題及時解答; 5、服務(wù)周到:發(fā)貨及時,三個工作日順豐快遞;售后無憂,包退包換。 研發(fā)、生產(chǎn)科研產(chǎn)品: ELISA試劑盒:多種屬、1000多種指標(biāo):人、大小鼠、通用、牛、兔、山羊、倉鼠、豬、馬、雞、犬、豚鼠、猴、綿羊 抗體:兔多抗、鼠單抗種類豐富,一抗1萬余種,二抗100多種; 重組蛋白:多項發(fā)明專利,原核表達(dá)系統(tǒng)穩(wěn)定表達(dá)蛋白1000余種。 ------------------------------------------ 在線聯(lián)系:17621047120(周經(jīng)理) QQ:2441609688(任經(jīng)理) 官方電話:400-788-2680 更多生化生理代測檢測服務(wù):http://www.sdkaiwen.com/daice-34-151-1.html |