多酚氧化酶(PPO)代測檢測服務
本篇關于生理生化檢測待測服務中抗氧化類的多酚氧化酶(PPO)如何測定以及測定原理進行簡單闡述。 測定原理 鄰苯二酚在多酚氧化酶催化下受O2作用生成鄰苯二醌,鄰苯二醌能夠被抗壞血酸還原,如抗壞血酸充足,少量鄰苯二酚可反復不斷地發(fā)生氧化還原。由于該酶最適pH為6,因此這一過程在pH6時最快。 把分析對象配成pH6左右的樣液,在抗壞血酸和鄰苯二酚存在時,于20℃下振蕩2min,這時抗壞血酸被氧化。精確的經過2min后加入偏磷酸以終止反應。用碘量法(以碘酸鉀為基準試劑)進行滴定,測得剩余的抗壞血酸。由得到的數(shù)據(jù)求出被氧化的抗壞血酸量,并計算出酶活性,并以1g分析物質1min內氧化抗壞血酸的微克分子數(shù)表示之。 多酚氧化酶是一種含銅的氧化酶,在有氧的條件下,能使一元酚和二元酚氧化產生醌。用分光光度法在525nm波長下測其吸光度,即可計算出多酚氧化酶的活力和比活性。 反應式如下:
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