γ-谷氨酰半胱氨酸銜接酶(GCL)
測(cè)定意義: GCL是GSH合成的限速酶,GSH對(duì)GCL有反應(yīng)抑止作用。GCL基因表達(dá)受多種要素調(diào)理,如氧化劑、抗氧化劑、生長(zhǎng)因子和炎癥因子等。GCL活性上下對(duì)GSH含量和GSH/GSSG比值有重要影響。 測(cè)定原理: 在ATP和Mg2+存在下,GCL催化谷氨酸和半胱氨酸合成γ-谷氨酰半胱氨酸;同時(shí)ATP去磷酸化產(chǎn)生無(wú)機(jī)磷分子,經(jīng)過(guò)測(cè)定無(wú)機(jī)磷增加速率,即可計(jì)算出GCL活性。 GCL測(cè)定操作 1.分光光度計(jì)預(yù)熱30min,調(diào)理波長(zhǎng)到660nm,蒸餾水調(diào)零。 2.2.空白管:取1.5mLEp管,依次參加試劑一240μL、試劑二260μL、試劑三60μL和蒸餾水120μL,混勻后蓋緊,37℃水浴精確反響15min;再參加試劑四300μL,混勻后,25℃、8000g,離心10min,取上清500μL,參加試劑五500μL,混勻后蓋緊,45℃水浴10min,冷卻后測(cè)定660nm處吸光值,記為A空白管。 3.3.測(cè)定管:取1.5mLEp管,依次參加試劑一240μL、試劑二260μL、試劑三60μL和上清液120μL,混勻后蓋緊,37℃水浴精確反響15min;再參加試劑四300μL,混勻后,25℃、8000g,離心10min,取上清500μL,參加試劑五500μL,混勻后蓋緊,45℃水浴10min,冷卻后測(cè)定660nm處吸光值,記為A測(cè)定管。 上海原鑫品牌優(yōu)勢(shì) 1、產(chǎn)品優(yōu)勢(shì):產(chǎn)品具有高特異性、回收率高、線性好、變異系數(shù)低、穩(wěn)定性好; 2、質(zhì)量保證:產(chǎn)質(zhì)量量穩(wěn)定,每批次產(chǎn)品必需經(jīng)過(guò)QA、QC檢測(cè)才可出庫(kù); 3、實(shí)力強(qiáng)大:ISO9001:2015認(rèn)證,規(guī)范實(shí)驗(yàn)室、研發(fā)中心,動(dòng)物房,高新技術(shù)企業(yè); 4、技術(shù)支持:技術(shù)部5*8小時(shí)技術(shù)問(wèn)題及時(shí)解答; 5、效勞周到:發(fā)貨及時(shí),三個(gè)工作日順豐快遞;售后無(wú)憂,包退包換。 研發(fā)、消費(fèi)科研產(chǎn)品: ELISA試劑盒:多種屬、1000多種指標(biāo):人、大小鼠、通用、牛、兔、山羊、倉(cāng)鼠、豬、馬、雞、犬、豚鼠、猴、綿羊 抗體:兔多抗、鼠單抗品種豐厚,一抗1萬(wàn)余種,二抗100多種; 重組蛋白:多項(xiàng)創(chuàng)造專(zhuān)利,原核表達(dá)系統(tǒng)穩(wěn)定表達(dá)蛋白1000余種。 在線聯(lián)絡(luò):17621047120(周經(jīng)理)QQ:2441609688(任經(jīng)理) 官方電話:400-788-2680 更多生化生理代測(cè)檢測(cè)效勞:http://www.sdkaiwen.com/product-33-124-1.html |