本章簡(jiǎn)述人白細(xì)胞介素6ELISA試劑盒說明書，由于文章信息較大，所以在此對(duì)說明書進(jìn)行分樣發(fā)布，需要詳細(xì)人白細(xì)胞介素6ELISA試劑盒說明書的可以致電原鑫生物科技獲取或直接到官方網(wǎng)站進(jìn)行下載。承接人白細(xì)胞介素6ELISA試劑盒說明書（一）的部分，本篇具體說明人白細(xì)胞介素6ELISA試劑盒需要自備的實(shí)驗(yàn)材料、樣本手機(jī)和儲(chǔ)存、試劑盒的準(zhǔn)備以及檢測(cè)步驟，供各位科研人員進(jìn)行參考。 
一.首先看看人白細(xì)胞介素6elisa試劑盒組成以及存儲(chǔ)的知識(shí) 
二. 再來看看人白細(xì)胞介素6ELISA試劑盒需要實(shí)驗(yàn)用的器材 1． 酶標(biāo)儀 2． 高精度移液器及一次性吸頭：0.5-10,2-20,20-200,200-1000μl 3． 洗板機(jī) 4． 37℃孵育箱 5． 超純水，去離子水 6． 一次性稀釋用聚丙烯試管
三.樣本收集及儲(chǔ)存
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清： 將細(xì)胞培養(yǎng)基移至無菌離心管，在 4℃條件下 1000 ×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并 于-20℃下保存（24 小時(shí)內(nèi)檢測(cè)可放入 2-8℃儲(chǔ)存），避免反復(fù)凍融。 2. 血清樣本： 室溫血液自然凝固 20 min 后，在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min，然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存（24 小時(shí)內(nèi)檢測(cè)可放入 2-8℃儲(chǔ)存），保存過程中如有沉淀，請(qǐng)?jiān)俅坞x心，避免反復(fù)凍融。 3. 血漿樣本： 將全血收集到含抗血凝劑的管中，根據(jù)標(biāo)本的實(shí)際要求選擇 EDTA，檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混 合 20 min，在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min，然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存（24 小時(shí)內(nèi)檢測(cè)可放入 2-8℃儲(chǔ)存），避免反復(fù)凍融。 4. 需要注意的是：血清血漿樣本避免使用溶血、高血脂樣本，以免影響檢測(cè)結(jié)果；如果樣本中的靶標(biāo)物檢測(cè)濃度高 于標(biāo)準(zhǔn)品的最高值，請(qǐng)將樣品做適當(dāng)倍數(shù)稀釋后檢測(cè)，建議正式實(shí)驗(yàn)前做預(yù)實(shí)驗(yàn)以確定稀釋倍數(shù)。
四.人白細(xì)胞介素6ELISA試劑盒的準(zhǔn)備工作 
1. 試劑回溫：首先在實(shí)驗(yàn)前 30 min 將試劑盒，待測(cè)樣本放置于室溫下復(fù)溫。 2. 配制洗滌液：預(yù)先計(jì)算好稀釋后的洗滌液使用體積，然后用超純水或去離子水將 20 倍濃縮洗滌液稀釋 成 1 倍應(yīng)用液，未用完的濃縮洗滌液放入 4℃冰箱保存。 3. 標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋：在標(biāo)準(zhǔn)品中加入1ml標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液至完全溶解，按照濃度為350pg/ml、175pg/ml、87.5pg/ml、43.75pg/ml、21.88pg/ml、10.94pg/ml、5.47pg/ml進(jìn)行等比稀釋，具體操作如下圖所示。
五.人白細(xì)胞介素6ELISA試劑盒檢測(cè)步驟
1 按照實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，在標(biāo)準(zhǔn)品與樣本孔中加樣100ul，空白對(duì)照不加
2 25℃避光孵育2h 3 棄去液體，用洗滌液清洗4次，每次每孔至少加洗滌液300ul，洗完后吸水紙上拍干 4 加入酶標(biāo)抗體溶液100ul，空白對(duì)照不加，25℃避光孵育1h 5 同步驟3 6 每孔加入底物A、B各50ul，25℃避光孵育20min，顯色淺可適當(dāng)延長孵育時(shí)間 7 加入終止液50ul，10min內(nèi)在450nm波長處測(cè)OD值
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