上海原鑫生物科技從事科研試劑的優(yōu)質(zhì)企業(yè)。該文章詳細(xì)的介紹了人白細(xì)胞介素6 ELISA試劑盒的背景、檢測(cè)原理、注意事項(xiàng)和安全提示這四個(gè)方面。本文僅供于科研研究,不得用于臨床試驗(yàn)!
背景簡(jiǎn)介 白細(xì)胞介素-6(IL-6)是一種多功能的α-螺旋細(xì)胞因子,調(diào)節(jié)多種組織細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化,在免疫應(yīng)答和急性期反應(yīng)中發(fā)揮重要作用。IL-6蛋白是由多種細(xì)胞(包括T細(xì)胞和巨噬細(xì)胞)分泌的磷酸化和可變糖基化分子。它通過(guò)異源二聚體發(fā)揮作用,異源二聚體受體由缺乏酪氨酸激酶結(jié)構(gòu)域并以低親和力結(jié)合IL-6的IL-6R和結(jié)合IL-6的廣泛表達(dá)的糖蛋白13(gp13)組成。IL-6R復(fù)合物具有很高的親和力,因此可以傳遞信號(hào)。IL-6還與造血、骨代謝和癌癥有密切關(guān)系,并且在從先天性免疫向獲得性免疫的轉(zhuǎn)變中起著重要作用。 一、檢測(cè)原理 酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)是一種固相夾心ELISA(酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn))。它利用在96孔板上包被人白細(xì)胞介素-6的單克隆抗體,將標(biāo)準(zhǔn)品和樣本添加到孔中,使白細(xì)胞介素-6與固定化抗體結(jié)合,然后加入辣根過(guò)氧化物酶結(jié)合的小鼠抗人白細(xì)胞介素-6的單克隆抗體,產(chǎn)生抗原-抗體-抗原的“三明治”結(jié)構(gòu)。再次清洗并加入TMB基質(zhì)溶液,其產(chǎn)生的顏色深淺與樣品中人白細(xì)胞介素的含量成線性關(guān)系。結(jié)束酶反應(yīng),添加停止溶液,并在450nm處讀取微孔吸光度。
二、注意事項(xiàng)
1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用,請(qǐng)不要使用過(guò)期的試劑。 2. 試劑盒未使用時(shí)應(yīng)保存在 2-8℃冰箱,復(fù)溶標(biāo)準(zhǔn)品請(qǐng)當(dāng)天使用。 3. 試劑盒使用前請(qǐng)?jiān)谑覝叵聫?fù)溫 30 min,配置試劑請(qǐng)充分混勻。 4. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本建議作復(fù)孔檢測(cè)。 5. 為避免交叉污染,請(qǐng)?jiān)谠囼?yàn)中使用 1 次性試管,槍頭,封板膜,及潔凈塑料容器。 6. 檢測(cè)抗體HRP酶結(jié)合物溶液為即用型,請(qǐng)于2-8℃保存,禁止冷凍保存。 7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液,顯色液和終止液可以通用外,請(qǐng)不要使用其他來(lái)源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個(gè)組分。 8. 為保證結(jié)果準(zhǔn)確,每次檢測(cè)均需做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
四、安全提示
試劑盒中的終止液為酸性溶液,操作人員在使用時(shí)請(qǐng)帶上手套并注意防護(hù);在操作過(guò)程中也要避免試 劑接觸皮膚和眼睛,如果不慎接觸,請(qǐng)用大量清水清洗;檢測(cè)血液樣本及其它體液樣本時(shí),請(qǐng)按國(guó)家生物 實(shí)驗(yàn)室安全防護(hù)有關(guān)管理規(guī)定執(zhí)行。 以上是原鑫生物科技有限公司對(duì)于人白細(xì)胞介素6 ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)的發(fā)布內(nèi)容之一,未完待續(xù)。 |