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| 人百日咳毒素(PT)ELISAKit試劑盒/測試盒 |
 品牌：原鑫生物
貨號：YX-E100602
規(guī)格：48T/96T
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人百日咳毒素(PT)ELISAKit試劑盒/測試盒 
詳細信息 貨號：E-10577 品牌：原鑫生物 數(shù)量：大量 供應(yīng)商：上海原鑫生物科技有限公司 檢測限：6個月 檢測方法：酶聯(lián)免疫法 應(yīng)用：僅用于科研 適應(yīng)物種：其它 標記物：詳詢 樣本：其它 規(guī)格：96T/48T 詳細說明書歡迎來電咨詢!試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用 目的：本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中ELISA的含量。實驗原理： 試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被ELISA捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的ELISA呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。 試劑盒組成： 試劑盒組成48孔配置96孔配置備注微孔酶標板12孔*4條12孔*8條2-8℃保存標準品0.3ml*6管0.3ml*6管2-8℃保存樣本稀釋液6mL3mL2-8℃保存檢測抗體-HRP10mL5mL2-8℃保存20×洗滌緩沖液25mL15mL按說明書進行稀釋底物A6mL3mL2-8℃保存底物B6mL6mL2-8℃保存終止液6mL6mL2-8℃保存封板膜2張2張無說明書1份1份無自封袋1個1個無。 樣本處理及要求： 1.血清：將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜，然后1000×g離心20分鐘，取上清即可，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 2.血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本，并將標本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 3.組織勻漿：用預(yù)冷的PBS(0.01M,pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結(jié)果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整，并做好記錄。 推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞，可以對勻漿液進行超聲破碎，或反復(fù)凍融。最后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測。 4.細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本：請1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 注：標本溶血會影響最后檢測結(jié)果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。
操作步驟：
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。 2.設(shè)置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL； 3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。 4.除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。 5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸 水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機洗板）。 6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。 7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。 注意事項： 1.嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。 2.洗板不正確可以導致不準確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。 3.消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值。 4.底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色，已經(jīng)變藍的底物液不能使用。 5.避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果。 6.在儲存和溫育時避免強光直接照射。 7.平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。 8.任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。 9.不能使用過期產(chǎn)品。10.如果可能傳播疾病，所有的樣品都應(yīng)管理好，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。 需要而未提供的試劑和器材： 1.酶標儀（450nm）。 2.高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒溫箱4.蒸餾水或去離子水。 試劑準備：試劑盒 從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。 實驗結(jié)果計算：以所測標準品的OD值為橫坐標，標準品的濃度值為縱坐標，在坐標紙上或用相關(guān)軟件繪制標準曲線，并得到直線回歸方程，將樣品的OD值代入方程，計算出樣品的濃度。 試劑盒性能： 1.檢測范圍：15pg/mL–480pg/mL。 2.靈敏度：最低檢測濃度小于1.0pg/mL。 3.特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。 4.重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)小于10%，板間變異系數(shù)小于15%。
研發(fā)、生產(chǎn)科研產(chǎn)品：
ELISA試劑盒：多種屬、1000多種指標：人、大小鼠、通用、牛、兔、山羊、倉鼠、豬、馬、雞、犬、豚鼠、猴、綿羊 抗體：兔多抗、鼠單抗種類豐富，一抗1萬余種，二抗100多種； 重組蛋白：多項發(fā)明專利，原核表達系統(tǒng)穩(wěn)定表達蛋白1000余種。 在線聯(lián)系：（周經(jīng)理） 17621047120QQ：2441609688（任經(jīng)理） 官方電話： 400-788-2680 更多elisa試劑盒：http://www.sdkaiwen.com/product-32-1-1.html
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400-788-2680
