|
| 人萊姆IgG(Lyme-IgG)ELISA Kit試劑盒/測(cè)試盒 |
 品牌：原鑫生物
貨號(hào)：YS01548B
規(guī)格：48T/96T
|
 立即購(gòu)買 |
|
人萊姆IgG(Lyme-IgG)ELISA Kit試劑盒/測(cè)試盒 
詳細(xì)信息 貨號(hào)：YS01548B 品牌：原鑫生物 供應(yīng)商：上海原鑫生物科技有限公司 檢測(cè)限：1pg/mol 檢測(cè)方法：酶聯(lián)免疫法/雙抗夾心法 樣本：血清，血漿，細(xì)胞，組織，體液等 規(guī)格：48T/96T 產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)：上海原鑫生物的試劑盒吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體，適用多種標(biāo)本類型并節(jié)約成本。其高效、靈敏、特異的抗體與高效、靈敏、特異的抗體使實(shí)驗(yàn)曲線更完美。是一款可以讓您放心選購(gòu)的ELISA試劑盒產(chǎn)品。 檢測(cè)范圍：7pg/ml-220pg/ml 使用目的：本試劑盒用于測(cè)定山羊血清、血漿及相關(guān)液體樣本中小反芻獸疫抗體(PPRAb)含量。 實(shí)驗(yàn)原理 本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測(cè)定標(biāo)本中山羊小反芻獸疫抗體(PPRAb)水平。用純化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被單抗的微孔中依次加入小反芻獸疫抗體(PPRAb)，再與HRP標(biāo)記的抗原結(jié)合，形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小反芻獸疫抗體(PPRAb)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中山羊小反芻獸疫抗體(PPRAb)濃度。儀器、原料和試劑儀器聚苯乙烯96孔酶標(biāo)板、微量移液管、酶聯(lián)免疫閱讀儀、洗板儀。 標(biāo)本要求 1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能 馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融 2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。 試劑及試劑配制 1.抗原及酶標(biāo)記抗體 ①抗原：IgG ②酶標(biāo)抗抗體：羊抗鼠IgG-HRP 2.包被液（CBS）：Na2CO30.8g，NaHCO31.46g，水溶解，定容500ml。 3.封閉液（3％BSA+CBS或5％牛奶+CBS）：含3％牛血清白蛋白（BSA）：10mLCBS中加入0.3gBSA。含5％荷蘭牛奶：10mLCBS中加入0.5g牛奶。 4.洗滌液（PBST10*）：KH2PO44g，Na2HPO4·12H2O58g，NaCl160g，KCl4g，Tween-2010mL加水定容2L。 5.洗滌液(1*PBS)：PBST：H2O=1：9 6.底物溶液（4甲基酰苯氨）①TMB底物緩沖液(0.005mol/LPH3.6醋酸鈉-檸檬酸緩沖液)：稱NaAc·3H2O：1.13g，C6H8O7·H2O：1.05g，用蒸餾水溶解，定容至1000mL，調(diào)PH=3.6。②TMB底物液：稱3,3＇,5,5＇-四甲基聯(lián)苯胺（TMB）0.08g溶于40mL二甲基亞砜（DMSO）中，加60mL甲醇，混勻，加100mL底物緩沖液，在暗處避光攪拌2小時(shí)至溶解，4℃避光保存。③H2O2底物液：取140μL過氧化氫（H2O2）加入200mL底物緩沖液混勻。④底物應(yīng)用液：現(xiàn)用現(xiàn)配，TMB:H2O2=1:1混勻。 7.終止液：2mol/LH2SO4 四、操作步驟 ①抗原包被過夜（12h以上）：IgG抗原，用包被液（CBS）稀釋，100μL/孔加入聚苯乙烯96孔反應(yīng)板中。4℃放置過夜。 抗原用量：0.1μg*100N/抗原濃度（N為板數(shù)） ②封閉：棄上清加300μL/孔封閉液，37℃放置2h。 ③洗滌：用洗滌液洗3次 ④加一抗(待測(cè)樣品為細(xì)胞培養(yǎng)上清)：將含單克降抗體的細(xì)胞培養(yǎng)上清100μL/孔加到已包被的板上，空白培養(yǎng)基作為陰性對(duì)照，已知樣品血清（1：200稀釋于1%BSA+PBST中）作為陽(yáng)性對(duì)照。37℃恒溫箱溫育2h。測(cè)免疫效價(jià)待測(cè)樣品為小鼠血清時(shí)：采小鼠血液于常溫20min左右后放4℃至析出血清，3000r10min離心。將含抗體的血清在已包被的板上用1%BSA+PBST連續(xù)倍比稀釋(按照1：200開始)，100μL/孔。每個(gè)樣品平行做兩份，小鼠陰性血清或空白培養(yǎng)基作為陰性對(duì)照，已知樣品作為陽(yáng)性對(duì)照。37℃恒溫箱溫育2h。 ⑤洗滌：用洗滌液洗5次。 ⑥加二抗（酶標(biāo)抗抗體）：羊抗鼠IgG-HRP，用1%BSA+PBSTl：10000稀釋，100μL／孔，37℃恒溫箱溫育1h。 ⑦洗滌：用洗滌液洗5次， ⑧顯色：加新鮮配制的底物溶液(TMB:H2O2=1:1)100μL/孔，37℃恒溫箱放置10min，顯示藍(lán)色。 ⑨終止反應(yīng)、比色：加30μL/孔H2SO4終止液．顏色變黃；用酶標(biāo)儀測(cè)定450nm630nm處各孔的吸光值，陽(yáng)性反應(yīng)的最大稀釋度為待測(cè)樣品的效價(jià)。
研發(fā)、生產(chǎn)科研產(chǎn)品：
ELISA試劑盒：多種屬、1000多種指標(biāo)：人、大小鼠、通用、牛、兔、山羊、倉(cāng)鼠、豬、馬、雞、犬、豚鼠、猴、綿羊 抗體：兔多抗、鼠單抗種類豐富，一抗1萬(wàn)余種，二抗100多種； 重組蛋白：多項(xiàng)發(fā)明專利，原核表達(dá)系統(tǒng)穩(wěn)定表達(dá)蛋白1000余種。 在線聯(lián)系：（周經(jīng)理） 17621047120QQ：2441609688（任經(jīng)理） 官方電話： 400-788-2680 更多elisa試劑盒：http://www.sdkaiwen.com/product-32-1-1.html
|
400-788-2680
