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人抗胰蛋白酶(AT) elisa Kit試劑盒/測(cè)試盒
人抗胰蛋白酶(AT) elisa Kit試劑盒/測(cè)試盒
品牌:原鑫生物
貨號(hào):CK-E10505
規(guī)格:48T/96T
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人抗胰蛋白酶(AT)ELISA Kit試劑盒

人抗胰蛋白酶(AT)ELISA Kit試劑盒

本篇主要講述人抗胰蛋白酶(AT)ELISA Kit試劑盒的使用說(shuō)明以及注意事項(xiàng),希望對(duì)各位科研人員有相對(duì)的幫助。

首先來(lái)看下人抗胰蛋白酶(AT)ELISA Kit試劑盒的詳細(xì)信息。

貨號(hào): CK-E10505

品牌: 原鑫生物

供應(yīng)商:上海原鑫生物科技有限公司

檢測(cè)限: /

檢測(cè)方法: 酶聯(lián)免疫法雙抗夾心法

人抗胰蛋白酶(AT)elisa試劑盒的應(yīng)用方式:

適應(yīng)物種: 人/動(dòng)物/植物

樣本: 血清、血漿、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織液等

規(guī)格: 96T/48T


精密度計(jì)算以及測(cè)試

人抗胰蛋白酶(AT)ELISA Kit試劑盒的精密度用樣品測(cè)定值的變異系數(shù)CV表示。CV(%) = SD/mean×100

批內(nèi)差:取同批次試劑盒對(duì)低、中、高值定值樣本進(jìn)行定量檢測(cè),每份樣本連續(xù)測(cè)定20 次,分別計(jì)算不同濃度樣本的平均值

及SD值。

批間差:選取3個(gè)不同批次的試劑盒分別對(duì)低、中、高值定值樣本進(jìn)行定量測(cè)定,每個(gè)樣本使用同一試劑盒重復(fù)測(cè)定8次,分

別計(jì)算不同濃度樣本的平均值及SD值。

批內(nèi)差: CV<10%

批間差: CV<12%


人抗胰蛋白酶(AT)ELISA Kit試劑盒的注意事項(xiàng):

◆標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè)。如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng)。保存過(guò)久可發(fā)生聚合在ELISA中可使本底加深。

◆凍結(jié)標(biāo)本溶解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下顛倒混合,不要在混勻器上強(qiáng)烈震蕩。   ◆渾濁或有沉淀的標(biāo)本應(yīng)先離心或過(guò)濾,澄清后再檢測(cè)。

◆反復(fù)凍融會(huì)使蛋白效價(jià)降低,所以代測(cè)樣本如需保存作多次檢測(cè),宜少量分裝冰存。

ELISA實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線平直,一般有以下原因:標(biāo)準(zhǔn)曲線制備是否不當(dāng),洗孔不凈,吸孔不充分,讀數(shù)不準(zhǔn)確或是吸量誤差。查找原因,即可找到相應(yīng)解決方案。     


人抗胰蛋白酶(AT)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)前預(yù)備

1、使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37℃溶解。

2、標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為 10,000pg/mL(貯液)。先將其稀釋為5,0000pg/mL(標(biāo)準(zhǔn)曲線最高濃度)后,再準(zhǔn)備7個(gè)稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管,每個(gè)EP管中加入500μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,依次倍比稀釋成 5,000pg/mL,2,500pg/mL,1,250pg/mL,625pg/mL,312pg/mL,156pg/mL,78pg/mL,標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

3、檢測(cè)溶液A及檢測(cè)溶液B:Detection A 及Detection B 在使用前請(qǐng)手甩幾下或少時(shí)離心處理,以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。臨用前分別以檢測(cè)稀釋液 A 或 B1:100 稀釋(如:10μL 檢測(cè)溶液 A/990μL 檢測(cè)稀釋液 A),充分混勻,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(100μL/孔),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2mL。

4、濃洗滌液:用 580mL 蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進(jìn)行30倍稀釋。

5、底物溶液:請(qǐng)用滅菌的移液器吸頭吸取所需體積的 TMB 至另一干凈容器中使用,容器中剩余的底物應(yīng)予丟棄,不要倒回TMB瓶中。

人抗胰蛋白酶(AT)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)

1、手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘,根據(jù)需要,重復(fù)此過(guò)程數(shù)次。

2、自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過(guò)程中。

3、只有全部使用KA&M-BIO配套試劑才能保證檢測(cè)效果,因?yàn)樗性噭┒际怯嘘P(guān)聯(lián)的,不能混用其他制造商的產(chǎn)品。只有嚴(yán)格遵守KA&M-BIO試劑盒的說(shuō)明操作才會(huì)得到最佳的檢測(cè)結(jié)果。

4、在儲(chǔ)存及孵育過(guò)程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染,試劑避免受到微生物的污染,因?yàn)榈鞍姿饷傅母蓴_將導(dǎo)致出現(xiàn)錯(cuò)誤的結(jié)果。

5、濃洗滌液會(huì)有鹽析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。

6、剛開啟的酶標(biāo)板孔中可能會(huì)有少許水樣物質(zhì),此為正?,F(xiàn)象,不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。

7、所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測(cè)裝置。

8、有效期:6個(gè)月。


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