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細菌細胞總蛋白提取試劑盒 |
品牌:原鑫生物
貨號:PH0311
規(guī)格:50T/¥589
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細菌細胞總蛋白提取試劑盒 (¥589優(yōu)惠活動)
細菌細胞總蛋白提取試劑盒基本信息: 1、 細菌細胞總蛋白提取試劑盒說明:經(jīng)典的細胞蛋白質分離流程由下述主要步驟組成:清洗組織或細胞;裂解細胞;離心去沉淀獲得可溶性蛋白質粗提物(可依據(jù)
目標蛋白質的理化特性特別的調配裂解緩沖液); 通過有機溶劑或鹽析等沉淀離心、層析、電泳等方法進一步純化,得到目的產(chǎn)物蛋白。
2、本試劑使用溫和的非離子型去污劑,適用于大腸桿菌表達的重組蛋白的蛋白提取。本產(chǎn)品可應用于從細菌裂解液中提取可溶性蛋白。
所提取的蛋白保持了生物學活性,可進行 IP,Western Blot,蛋白純化等下游操作。
細菌細胞總蛋白提取試劑盒產(chǎn)品儲存:本試劑在室溫干燥條件下,可保存 6 個月。溶菌酶貯存液、100×蛋白酶抑制劑和 50%甘油 2-8℃保存 細菌細胞總蛋白提取試劑盒組成圖:
細菌細胞總蛋白提取試劑盒使用說明: 1、離心收集細菌細胞, 按照每克濕菌取用 5-6ml 細菌細胞漂洗液的比例,于 20℃~37℃將細胞懸浮起來后,4℃,12000g,1-2min 離
心除去細菌細胞漂洗液,漂洗 2 次。(離心只是收集細胞,轉速、時間可自行調整。) 2、離心除去細菌細胞漂洗液后,按每克濕菌細胞,加入 5ml 細菌細胞蛋白裂解液,250ul 溶菌酶貯存液和 50ul 100×蛋白酶抑制劑,混懸
細菌細胞樣品。 3、混旋或顛倒試管幾次后,20℃~37℃溫育 10~20 分鐘,同時輕輕搖動。
*若蛋白表達量較低,建議結合超聲粉碎,置冰上后,采用 300w,10s 超聲/10s 間隔,超聲 20min,至菌液變清或者變色。
*若目的蛋白不穩(wěn)定,可冰浴中孵育,且時間可以減少,裂解液內(nèi)加入 0.2 倍體積。 4、細胞破碎后的勻漿液,根據(jù)您不同需要可以在 10000g 離心 10min 到 100000g 離心 1h 范圍離心。沉淀棄去。上清即為含有目的蛋
白質的粗提物。
注意:若目的蛋白不穩(wěn)定,冰浴中孵育時間可以減少甚至取消,裂解液內(nèi)加入 0.2 倍體積 50%甘油也可以穩(wěn)定目的蛋白。 細菌細胞總蛋白提取試劑盒產(chǎn)品預定:http://www.sdkaiwen.com/products-287.html
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