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小鼠白介素1β(IL-1β)elisa試劑盒 |
品牌:原鑫生物
貨號:YX-SS-B35721
規(guī)格:48T/96T
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小鼠白介素1β(IL-1β)elisa試劑盒 小鼠白介素1β(IL-1β)elisa試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗小鼠IL-1β抗體包被于酶標(biāo)板上,實(shí)驗(yàn)時(shí)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品中的小鼠IL-1β會(huì)與包被抗體結(jié)合,游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠IL-1β抗體和辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素??剐∈驣L-1β抗體與結(jié)合在包被抗體上的小鼠IL-1β結(jié)合、生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物,游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB),TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍(lán)色,加終止液后變成黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長處測OD值,IL-1β濃度與OD450值之間呈正比,通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中IL-1β的濃度。
1.血清:全血樣品于室溫放置1小時(shí)或2-8℃過夜后于2-8℃,1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測。 2.血漿:抗凝劑推薦使用EDTA-Na2,樣品采集后30分鐘內(nèi)于2-8℃,1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測。 組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液,稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與
對應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1 g的組織樣品對應(yīng)9 mL的PBS,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適
當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,在冰上充分研磨。為了進(jìn)一步
裂解組織細(xì)胞,可以對勻漿液進(jìn)行反復(fù)凍融或超聲破碎。最后將勻漿液于2-8℃,5000×g離心5-10分鐘,取
上清檢測。 3. 細(xì)胞提取液:貼壁 細(xì)胞用冷的PBS輕輕清洗,然后用胰蛋白酶消化,1000×g離心5分鐘后收集細(xì)胞;懸浮
細(xì)胞可直接離心收集。收集的細(xì)胞用冷的PBS洗滌3次。每106個(gè)細(xì)胞中加入150-200 μL PBS重懸(推薦在PBS
中加入蛋白酶抑制劑;若含量很低可減少PBS的體積)并通過反復(fù)凍融或超聲使細(xì)胞破碎。
將提取液于2-8℃,1500×g離心10分鐘,取上清檢測。 4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清或其他生物體液:
收集液體后于2-8℃,1000×g離心20分鐘,除去雜質(zhì)及細(xì)胞碎片。取上清檢測。
小鼠白介素1β(IL-1β)elisa試劑盒:http://www.sdkaiwen.com/products-454.html
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