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游離三碘甲狀腺原氨酸(fT3)elisa試劑盒采用競(jìng)爭(zhēng)ELISA法。用fT3抗原包被于酶標(biāo)板上,實(shí)驗(yàn)時(shí)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品中的fT3與包被的fT3競(jìng)爭(zhēng)生物素標(biāo)記的抗fT3單抗上的結(jié)合位點(diǎn),游離的成分被洗去。加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親和素,生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物,游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB),TMB在辣根過(guò)氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍(lán)色,加終止液后變成黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)處測(cè)OD值,fT3濃度與OD450值之間呈反比,通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中fT3的濃度。


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內(nèi)分泌干擾化學(xué)物質(zhì) (EDC) 被認(rèn)為是全球甲狀腺疾病負(fù)擔(dān)日益加重的主要因素之一,其中大多數(shù)化學(xué)物質(zhì)都有可能破壞甲狀腺激素 (THs) 合成和甲狀腺功能的其他調(diào)節(jié)途徑。對(duì)羥基苯甲酸丁酯 (BP) 是一種成熟的用作合成防腐劑的異生物質(zhì),尚未對(duì)其甲狀腺破壞潛力的分子機(jī)制進(jìn)行徹底評(píng)估。我們研究了 BP 對(duì)雌性 Wistar 大鼠皮下暴露于 BP 劑量為 1、5 和 10 mg/kg BW/天后甲狀腺過(guò)氧化物酶 (TPO) 和 1 型碘甲狀腺原氨酸脫碘酶 (D1) 活性和基因表達(dá)的影響分別為 BP1、BP5 和 BP10) 7 天和 21 天。結(jié)果表明,BP1和BP5顯著增加血清T3/T4比和TSH水平,而B(niǎo)P10顯著降低T4水平,而對(duì)TSH和T3水平?jīng)]有任何明顯影響。在 BP1 和 BP5 處,甲狀腺中的 TPO 活性顯著增加(p < 0.05),但 BP10 處理沒(méi)有顯示出像 17β-雌二醇 (E2) 那樣的效果。暴露 7 天后,BP 以劑量依賴(lài)性方式降低腎臟中的 D1 活性,而 D1 活性的降低僅在 BP1 給藥 21 天后才顯著(p < 0.05)。此外,7 天和 21 天的 BP 暴露導(dǎo)致甲狀腺中 Tpo mRNA 水平的顯著增加。在腎臟中,BP 在 7 天后下調(diào) Dio1 基因(編碼 D1)的表達(dá),但在治療 21 天后觀察到顯著的倍數(shù)增加。


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