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人囊蟲病抗體(CYT Ab)ELISA Kit試劑盒? |
品牌:原鑫生物
貨號(hào):YX-E100594
規(guī)格:48T/96T
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人囊蟲病抗體(CYT Ab)ELISA Kit試劑盒以其具有高特異性、回收率、線性、變異系數(shù)、穩(wěn)定性等特點(diǎn)深受國(guó)外市場(chǎng)認(rèn)可;原鑫生物專注于免疫學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、腫瘤、神經(jīng)生物學(xué)等領(lǐng)域。 ------------------------------------------------------------------------------------------------------------------ 產(chǎn)品介紹產(chǎn)品名稱:人囊蟲病抗體(CYT Ab)ELISA Kit品牌:原鑫生物 貨號(hào):YX-E100594 檢測(cè)方法:雙抗夾心 規(guī)格:48T/96T 種屬:Human 存儲(chǔ):2-8℃6個(gè)月 精密度(%):批內(nèi)差: CV<10% 批間差: CV<12% 注意事項(xiàng):人囊蟲病抗體(CYT Ab)ELISA Kit僅供科研使用
實(shí)驗(yàn)原理 【操作步驟】 1、取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置30分鐘。 2、分組:取出96孔板,根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。10個(gè)標(biāo)準(zhǔn)孔,1個(gè)空白對(duì)照 3、標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:準(zhǔn)備小試管6只,依次編好號(hào)碼,先在各小試管中加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100ul,然后取原濃度標(biāo)準(zhǔn)品100ul 加入一只已編好號(hào)的試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul 加入第二支試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul 加入第三只試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul 加入第四只試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul 加入第五只試管中,充分混勻;然后在該試管中取100ul,棄掉。第六只試管作為0 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。 4、加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入50ul的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中;空白對(duì)照孔加入50ul的蒸餾水;其余微孔中先加樣品40ul然后再加生物素標(biāo)記的抗體10ul。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。 5、溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。 6、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒棄去,如此重復(fù)5次,拍干。 7、加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組、待測(cè)樣本組各孔中加入50ul的酶標(biāo)溶液(空白對(duì)照孔除外)。 8、溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于37℃恒溫孵育1小時(shí)。 9、洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置15-30s,充分清洗酶標(biāo)板5次,用吸水紙徹底拍干。 10、顯色:各孔加入顯色劑A液50ul后,再加入顯色劑B液50ul。 11、終止:25-37℃下避光反應(yīng)10-15分鐘,加入50ul終止液。 12、讀板:在450nm波長(zhǎng)讀取各孔的OD值。 注:讀板時(shí)必須拭干板底殘留的液體和手指痕跡,讀板時(shí)間控制在終止反應(yīng)后的30分鐘內(nèi),以免影響準(zhǔn)確性。 試劑盒組成及試劑配制 1、酶聯(lián)板:一塊(96孔;48孔) 2、標(biāo)準(zhǔn)品:2瓶 3、樣品稀釋液:1×20ml/瓶 4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液:1×10ml/瓶 5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液:1×10ml/瓶 6、生物素標(biāo)記抗體:1×120μl/瓶(1:100) 7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素:1×120μl/瓶(1:100) 8、底物溶液:1×10ml/瓶 9、濃洗滌液:1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 10、終止液:1×10ml/瓶 【實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制】 1、儀器與材料:酶標(biāo)儀(使用前預(yù)熱30分鐘),微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水,濾紙。 2、洗液的配制:按比例配制洗液備用。 【樣品收集、處理及保存】 1、細(xì)胞培養(yǎng)上清: 適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。 2、細(xì)胞: 用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104-106/ml 左右,通過反復(fù)凍融,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,或者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測(cè)。 3、血清: 在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測(cè)。 4、血漿: 應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上清。 5、體液: 包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。 6、組織標(biāo)本: 切取組織標(biāo)本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,以2000-3000rmp離心20分鐘,收集上清進(jìn)行檢測(cè)。 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。 7、保存: 如果樣品不能立即檢測(cè),應(yīng)將其分裝,-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
研發(fā)、生產(chǎn)科研產(chǎn)品:
ELISA試劑盒:多種屬、1000多種指標(biāo):人、大小鼠、通用、牛、兔、山羊、倉(cāng)鼠、豬、馬、雞、犬、豚鼠、猴、綿羊 抗體:兔多抗、鼠單抗種類豐富,一抗1萬余種,二抗100多種; 重組蛋白:多項(xiàng)發(fā)明專利,原核表達(dá)系統(tǒng)穩(wěn)定表達(dá)蛋白1000余種。
在線聯(lián)系:(周經(jīng)理) 17621047120 QQ:2441609688(任經(jīng)理) 官方電話: 400-788-2680
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